主要講下用恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行抑菌測(cè)試：

抑菌圈法

(1)依次準(zhǔn)確稱(chēng)取3g牛肉稿、10g蛋白凍、5gNaCl、15g～20g瓊脂放入燒杯中。在上述燒杯中先加入少于所需要的水量，用玻璃棒攪勻，然后在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解。將藥品*溶解后，補(bǔ)充水到1L。在未調(diào)節(jié)pH前，先用精密pH試紙測(cè)量培養(yǎng)基的原始pH，如果偏酸性，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入lmol/LNaOH溶液，邊加溶液邊攪拌，并隨時(shí)用pH試紙測(cè)其pH，直至pH達(dá)到7.6。反之，用lmol/LHCl進(jìn)行調(diào)節(jié)。

(2)按實(shí)驗(yàn)要求，可將配制的培養(yǎng)基分裝入錐形瓶和試管內(nèi)。培養(yǎng)基分裝完畢后，在錐形瓶口和試管口塞上棉塞，以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)而造成污染，并保證有良好的通氣性能。加塞后，將全部錐形瓶和試管用麻繩捆好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時(shí)冷凝水潤(rùn)濕棉塞，其外再用一道麻繩扎好。用記號(hào)筆注明培養(yǎng)基名稱(chēng)、組別、配制日期。

(3)將上述培養(yǎng)基以0.103MPa，121℃，20min高壓蒸汽滅菌。將滅菌的試管培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，將試管口端擱在試管架上，擱置的斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管總長(zhǎng)的一半為宜。將滅菌培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24h，以檢查滅菌是否*。制得斜面培養(yǎng)基若干，供接種培養(yǎng)細(xì)菌備用。

(4)將細(xì)菌接種在斜面培養(yǎng)基上，在37℃下培養(yǎng)16-24h后轉(zhuǎn)接一次，在37℃下培養(yǎng)16-20h。

(5)將培養(yǎng)皿、試管、鑷子、玻璃杯、玻璃棒、移液管等經(jīng)清洗后放入電熱恒溫干燥箱烘干殺菌，在160℃下滅菌2h。

(6)依次取無(wú)菌磷酸鹽緩沖液10mL放入滅菌的試管中，在斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)菌放入個(gè)試管中混勻后取出1mL放入第二個(gè)試管，此時(shí)菌液濃度為10，如此反復(fù)進(jìn)行，使菌液濃度稀釋至10%。

(7)取1mL10菌液滴入到已滅菌的平皿中，取冷卻至50℃左右的營(yíng)養(yǎng)瓊脂20mL左右倒入平皿中并與菌液混勻。
(8)待營(yíng)養(yǎng)瓊脂凝固后，取壓制成形的抗菌樣品放入平板中央(以不破壞瓊脂平板為宜)，把培養(yǎng)基放入紫外燈下光照1h，培養(yǎng)基和紫外燈的距離大約20cm。
(9)將光照后的培養(yǎng)基放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)24h后觀(guān)察抑菌圈大小，按互成45℃的4個(gè)直徑方向測(cè)量透明抑菌圈直徑，計(jì)算平均值。