久9热这里有真品8,内射,欧美大荫蒂毛茸茸视频,亚洲中文字幕av一区二区三区

您好!歡迎訪問上海喆圖科學(xué)儀器有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)咨詢熱線:

400-001-0304

當前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 樹舌靈芝深層發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化研究

樹舌靈芝深層發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化研究

更新時間:2018-10-15  |  點擊率:2233

    今天喆圖小編就來說說樹舌靈芝又稱樹舌扁靈芝,屬于真菌門、擔子菌亞門、層菌綱、非菌褶目、靈芝菌科、靈芝屬。樹舌具有廣泛的藥理活性,民間用其治療食道癌、肺結(jié)核,臨床用于治療腹水癌、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、肝炎、心臟病、糖尿病和糖尿病并發(fā)癥,預(yù)防和治療胃潰瘍、急慢性胃炎、十二指腸潰瘍、胃酸過多等胃病。另外研究表明,樹舌三萜類物質(zhì)具有血壓雙向調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒等藥理活性。目前國內(nèi)對樹舌靈芝的化學(xué)成分和藥理學(xué)研究得比較多,但對樹舌靈芝深層發(fā)酵方面的研究較少。深層發(fā)酵培養(yǎng)樹舌菌絲體具有發(fā)酵周期短、工藝簡單、易控制、適于工業(yè)化大生產(chǎn)等優(yōu)點。本試驗應(yīng)用高氯酸——香草醛顯色法來測定樹舌靈芝發(fā)酵菌絲總?cè)祁惢衔锖?,以總?cè)飘a(chǎn)量為基準,篩選出樹舌靈芝深層發(fā)酵的適培養(yǎng)基。

    通過單因素試驗,確定樹舌靈芝的適宜氮源為豆餅粉,適宜碳源為米糠和蔗糖;在此基礎(chǔ)上,以篩選的碳源、氮源和無機鹽KH2PO4 和MgSO4·7H2O為考察因素,以總?cè)飘a(chǎn)量為主要指標利用正交試驗優(yōu)化培養(yǎng)基配方比例,確定樹舌靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:米糠4%、蔗糖1%、豆餅粉4%、KH2PO4 0.2%、MgSO4·7H2O 0.05%。  

     一、 (材料和儀器 )

    1、實驗所需材料  硝酸銨、硫酸銨、氯化銨、硝酸鉀、蛋白胨、酵母膏、葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、高氯酸、冰醋酸、香草醛均為分析純;齊墩果酸對照品,中國藥品生物制品檢定所;豆餅粉、玉米粉、麥芽粉、甘薯粉、米糠和麩皮均為提取液,煮沸0.5h后用紗布過濾制得。 

    2、實驗用主要儀器設(shè)備 

鼓風干燥箱,立式高壓滅菌鍋,電子天平,紫外分光光度計,恒溫水浴鍋,恒溫搖床,恒溫培養(yǎng)箱。  

    二、(實驗方法  :基本培養(yǎng)基)  

    1.1 斜面培養(yǎng)基  PDA培養(yǎng)基為土豆20%,葡萄糖2%,瓊脂2%,pH自然。接一塊綠豆粒菌塊接種于PDA培養(yǎng)基的中央,放入恒溫培養(yǎng)箱中25℃恒溫培養(yǎng)7天。 

    1.2 液體培養(yǎng)基  玉米粉1%,蔗糖2%,蛋白胨0.5%,KH2PO4 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,pH自然。 

    1.3 氮源篩選培養(yǎng)基  葡萄糖2%,可溶性淀粉1%,KH2PO4 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,PH自然。分別以豆餅粉、麩皮、蛋白胨、酵母膏、硫酸銨、硝酸銨、氯化銨、硝酸鉀為氮源,添加量為2%。 

    1.4 碳源篩選培養(yǎng)基  麩皮2%,KH2PO4 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,pH自然。分別以葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、玉米粉、麥芽粉、甘薯粉、米糠等為碳源,添加量為3%。  

培養(yǎng)方法  

    2.1 種子液制備  將斜面菌種分割成黃豆大小,接種到液體培養(yǎng)基中,250mL三角瓶裝液量100mL,于恒溫搖床中25℃,120r/min振蕩培養(yǎng)10d得一級種。將已經(jīng)培養(yǎng)好的一級種以體積分數(shù)10%接種到同樣液體培養(yǎng)基中,500mL三角瓶裝液量200mL,在與一級種同樣條件下培養(yǎng)7d得種子液備用。  

    2.2 培養(yǎng)基篩選  將制備好的種子液按體積分數(shù)10%接種量接種到不同的碳氮源培養(yǎng)基及正交試驗篩選培養(yǎng)基中,250mL三角瓶裝液量100mL,于恒溫搖床中25℃,120r/min振蕩培養(yǎng)7d后收集菌絲體。分析不同碳源、氮源對菌絲體生物量和三萜總量的影響。每次試驗重復(fù)3次,結(jié)果取平均值。   

    2.3 混合碳氮源培養(yǎng)基正交試驗  根據(jù)單因素試驗篩選結(jié)果,并考慮到低投入高產(chǎn)出的原則,選用米糠和蔗糖作為復(fù)合碳源,豆餅粉作為氮源,磷酸二氫鉀和硫酸鎂作為無機鹽,按L9(34)設(shè)計四因素三水平試驗,9個組合,4次重復(fù),優(yōu)化培養(yǎng)基。  

    2.4 發(fā)酵菌絲體生物量測定  采用細胞干重法,取100ml發(fā)酵液,用100目紗網(wǎng)過濾得菌絲體,并用蒸餾水反復(fù)沖洗,至濾出液澄清為止,收集菌絲體,于60℃鼓風干燥箱中烘干至恒重,稱重。  

    三、(三萜含量測定)  

    3.1 標準溶液的制備(200μg/ml齊墩果酸) 稱取干燥至恒重的齊墩果酸20mg,置于100ml的容量瓶中加無水乙醇溶解,并定容至刻度,作為對照品溶液。 

    3.2 樣品溶液的制備   取樣品0.5g(到萬分之一),加入10ml無水乙醇,超聲波提取30min后,搖勻,過濾,取濾液,定容至50mL,即得樣品溶液。用分光光度法測定樣品中靈芝三萜物質(zhì)含量。  

    3.3 標準曲線的制作   精密吸取齊墩果酸標準溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL, 于6只具塞磨口試管中。加5%香草醛-冰醋酸液0.4mL,搖勻。再加入0.6mL高氯酸,置于60℃恒溫水浴鍋中20 min,冰浴冷卻后,加冰醋酸5.0 mL,搖勻,置于室溫15 min后,按分光光度法(《中國藥典》2005版 I部附錄VA),以試劑為空白,在545nm處比色測定吸光度值。以齊墩果酸濃度(?g/ml) 為橫坐標,吸光度A為縱坐標,作圖得標準曲線。 

    3.4 樣品的測定   吸取1ml樣品溶液,按標準曲線方法測定吸光度。用標準曲線法計算樣品中總?cè)扑崽崛∥镔|(zhì)量。  

    以上內(nèi)容僅供參考,如需了解詳情請致電喆圖!喆圖人將真誠為您服務(wù)!

掃一掃,添加微信
地址:上海張江醫(yī)療器械產(chǎn)業(yè)基地(瑞慶路528號) 傳真:
©2024 上海喆圖科學(xué)儀器有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備14016230號-3
日日摸夜添夜夜夜添高潮| 夜夜爱夜夜做夜夜爽| 中文字幕无码乱人伦| 色一情一乱一伦一区二区三欧美| 久久久久久av| 少妇的秘密影视| 国产欧美一区二区三区在线看| 色网站在线| 久久久久久国产精品免费播放| 成人午夜| 色接久久| 天天综合精品| 91精品国| 九九热精品在线| 人人九九| 韩日高清二三区| 久久精品播放| 嫩草官网| 97超碰在线| 一本久| 精品人妻少妇嫩草av| 男女www| 中文字幕| 清镇市| 欧美97色伦欧美一区二区日韩| 亚洲色欲啪啪久久WWW综合网| 无遮挡又爽又刺激的视频| 成人三级a视99频在线观看| 天堂а√在线最新版中文在线| 窝窝午夜色视频国产精品破| 夜夜精品无码一区二区三区| 国内精品久久久久影院网站| 国产自愉自愉免费精品七区| 亚洲熟女少妇精品| 亚洲国产精品无码中文字APP| 精品国产一区二区三区香蕉| 四虎www成人影院观看| 日本强伦姧人妻一区二区| 人人澡人人透人人爽| 亚洲国产精品悠悠久久琪琪| 开心色播五月|